产品货号:
GL2506
中文名称:
超氧化物歧化酶(SOD)提取液
英文名称:
产品规格:
500mL
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品主要用于裂解组织样本、细胞样本,提取样品中的过氧化物酶。该试剂仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
超氧化物岐化酶(Superoxide Dismutase,SOD)是含金属辅基的酶,能催化超氧化物阴离子发生岐化作用,生成过氧化氢(H2O2)和氧气(O2),是生物体内一种重要的抗氧化酶,由于超氧自由基是不稳定的的自由基,寿命极短,SOD活性一般用间接方法测定,并利用各种呈色反应来测定SOD活力,其中显色剂有NBT(四氮唑蓝)、WST-1、WST-8等。
组分 | 规格 |
超氧化物歧化酶(SOD)提取液 | 500mL |
说明书 | 1份 |
保存:4℃,有效期1年。
- 蒸馏水
- 离心管或试管
- 匀浆器或研钵
- 低温离心机
- 待测样品中不能含有磷酸酶抑制剂,同时需避免反复冻融。
- 所测样本的值高于标准曲线的上限,用提取试剂稀释样品后重新测定。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
- 植物组织样品:取正常或逆境下的新鲜植物组织,清洗干净,擦干,切碎,迅速称取,按植物组织:超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂=0.5g:2mL的比例,加入预冷的超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂,冰浴情况下充分捣碎或研磨,用超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂冲洗研钵或匀浆器,合并冲洗液至该离心管,补加超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂至10mL,4℃ 4000g离心10min,取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的测定。
- 动物组织样品:动物用含有20U/mL Heparin的生理盐水(0.9% NaCl containing 20U/mL Heparin)灌流清除血液后获取组织样品;按照每100mg组织加入500μL SOD检测缓冲液的比例,用玻璃匀浆器在4℃或冰浴匀浆,4℃ 4000g离心10min,取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的测定。
- 血浆或含红细胞的样品:从待测样品中分理出的血清或血浆不应有溶血,如果含有应去除红细胞后检测,如超过检测范围,用超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂稀释后检测;血清去除红细胞的简易方法如下:用抗凝管收集血液,颠倒混匀,取至少500μL全血,4℃ 3000g离心5min,转移上清至另一新的1mL离心管中,适量生理盐水稀释后待测,亦可采用红细胞裂解液去除红细胞,如bjbalb ACK红细胞裂解液等。
- 细胞样品:对于贴壁细胞,由于后续用于酶活性的测定,避免使用胰酶消化细胞。可以使用细胞刮或EDTA处理细胞并收集细胞,细胞用无菌的PBS或生理盐水洗涤1次,按照每106细胞加入300~500μL超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂的比例,用玻璃匀浆器在4℃或冰浴匀浆,4℃ 10000g离心10min,取上清液(SOD粗提液)用于酶活性的测定。
- 上述样品准备完毕后可以BCA蛋白定量检测试剂盒测定蛋白浓度,通常10~20μg蛋白的细胞或组织匀浆液样品其中的SOD平均活力约1个活力单位左右(不同细胞和组织的差异会比较大,该活力范围仅作为初步的参考);每种样品准备20~100μg蛋白量通常已经足够用于后续检测;根据蛋白浓度和预计的蛋白使用量,用超氧化物歧化酶(SOD)提取试剂适当稀释样品。例如小鼠肝脏组织10%匀浆液(组织和匀浆液的重量比为10%)上清,通常需要稀释10~100倍,准备好的样品如果当天测定,可以冰浴保存;如果当天不能完成测定,可以-20℃冻存,但建议尽量当天完成测定。
样品粗酶液获得率(ml/g)=上清液体积(ml)/样品质量(g)×100%
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